【科研论文】结核分枝杆菌游离核酸有效提高结核性胸膜炎的确诊率

　　2020年8月，由首都医科大学附属北京胸科医院陈效友教授、车南颖教授、杨新婷教授以及北京大学临床研究所的汪海波教授等人合作研究，并在Clinical Microbiology and Infection杂志发表了《结核性胸膜炎胸腔积液中检测结核分枝杆菌游离DNA：诊断准确性研究》（Cell-free Mycobacterium tuberculosis DNA test in pleural effusion for tuberculous pleurisy: a diagnostic accuracy study）。该研究提出：结核分枝杆菌游离DNA检测(cf-TB)与Xpert MTB/RIF和分枝杆菌培养相比，特异性保持不变的情况下诊断敏感性显著提高，建议将cf-TB作为结核性胸膜炎诊断的一线检查手段。

　　结核性胸膜炎(Tuberculous pleurisy, TP)是最常见的肺外结核之一，也是胸腔积液最常见的原因之一。结核性胸膜炎典型的临床表现是一种急性综合征，包括发热、咳嗽、胸痛、呼吸困难和渗出性淋巴细胞性胸腔积液，由胸膜腔内结核分枝杆菌抗原引起的胸膜炎症反应。虽然有许多可用的诊断方法，但结核性胸膜炎由于含菌量较低且较难分离结核分枝杆菌，病原学确诊率非常低。

　　传统的诊断结核性胸膜炎的方法是从痰液、胸腔积液或胸膜活检标本中分出结核分枝杆菌，但常规的分枝杆菌培养（Mycobacterial culture，culture）方法敏感性较差，约为30%。实时荧光定量核酸扩增检测技术Xpert MTB/RIF（Xpert）是一种全自动核酸检测系统，已被世界卫生组织推荐用于结核病临床诊断，但敏感性也差强人意，约为34%-51%。此外，许多潜在的免疫学生物标记物也在胸腔积液中被研究，如腺苷脱氨酶(ADA)、干扰素(IFN-ɣ、IFN-ɣ释放试验(IGRAs)等，但大多数的生物标记物诊断准确性有限。另外，胸膜活检对结核性胸膜炎的诊断也是非常有效的，但作为有创检查，不适合常规开展。鉴于以上检测方法的局限性，临床诊断中迫切需要开发更准确、高效的方法来快速诊断结核性胸膜炎。

　　游离核酸的诊断用途在病原体检测、早期产前胎儿基因检测和癌症的“液体活检”等应用中得到了广泛的探索。核酸扩增检测，特别是实时定量PCR (Real-time quantitative PCR，qPCR)越来越多地应用于结核分枝杆菌基因组的快速检测。然而，在胸腔积液中结核菌载量特别低，导致结核分枝杆菌基因组DNA测试通常敏感性较差。因此，研究认为在胸腔积液中检测结核分枝杆菌游离核酸可以提高结核性胸膜炎的诊断的准确性。该研究通过前瞻性连续性纳入疑似结核性胸膜炎患者，评估了胸腔积液中结核分枝杆菌游离核酸检测（cf-TB）在结核性胸膜炎诊断中的准确性。

　　统计学结果显示，在胸腔积液的诊断中， cf-TB的敏感性为79.5%，显著高于Xpert的38.5%和culture的27.1% (p < .0001)。以胸腔积液病原学阳性（Xpert或culture阳性）作为参考标准， cf-TB敏感性可达96.6% (57/59)。鉴于结核分枝杆菌游离核酸检查(cf-TB)的优越表现，建议应用该方法作为结核性胸膜炎诊断的一线检查手段。

　　参考文献：Yang X, Che N, Duan H, et al. Cell-free Mycobacterium tuberculosis DNA test in pleural effusion for tuberculous pleurisy: a diagnostic accuracy study. Clin Microbiol Infect. 2020, 26(8):1089.e1-1089.e6.