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耐药基因检测技术在诊断耐多药结核病中的应用价值
我国是全球22个结核病高负担国家之一,结核病患者数量居全球第二位。同时我国耐多药结核病疫情也非常严重,是27个耐药结核病高负担国家之一。
结核病治疗是否成功,主要因素之一取决于患者自身感染的结核杆菌是否存在对抗结核药物产生耐药。抗结核药物异烟肼和利福平是目前抗结核治疗方案中最重要的两种药物。耐多药结核病是指结核病患者感染的结核杆菌同时对异烟肼和利福平两种药物耐药。因为耐多药结核病目前存在治疗周期长达两年,且疗效差、费用高、危害大,患者家庭成员被传染的几率高,往往患者思想包袱重,精神异常痛苦。鉴于目前治疗耐多药结核病的困难,现在耐多药结核病已被我省新农合列入重大疾病报销范围。
以往传统的耐多药结核病的诊断是靠结核杆菌培养、药物敏感试验来确定诊断的。传统方法是先把结核病患者标本中的结核杆菌培养出来,然后再把培养出来的结核杆菌做抗结核药物敏感试验,从而通过观察患者自身感染的结核杆菌是否存在对抗结核药物异烟肼和利福平耐药来诊断耐多药结核病。由于结核杆菌是一种缓慢生长的细菌,结核杆菌在人工培养基上需要培养1个月至2个月的时间才能生长出来,况且结核杆菌能否在人工培养基上顺利生长出来,还受患者留标本的质量、标本送检的时间、检验者的技术、检验设备等诸多因素的影响。即使结核杆菌培养出来后再做抗结核药物敏感试验,还需要1个月的时间才能报告药敏结果,前后往往需要2个月至3个月的时间才能取得检验报告结果。在检验报告结果出来前医师只能凭经验来判断该患者是否存在耐药,如此漫长的等待时间很容易延误患者的诊断和治疗。
耐药基因检测技术是采用先进的线性探针核酸杂交技术,将患者标本中的结核杆菌dna片段通过基因扩增仪进行大量扩增,然后将扩增后的产物在核酸杂交仪上同线性探针进行杂交、染色形成基因图谱,再将检验标本的基因图谱同标准的基因图谱进行比较,从而观察利福平ropb基因突变情况来确定该患者感染的结核杆菌是对利福平敏感还是耐药。异烟肼敏感和耐药情况的判断是根据katg基因和inha基因是否发生突变来决定。无论是新发现的结核患者、还是治疗过的老结核患者,只要标本中有结核杆菌,无论细菌是活菌还是死菌都可以检验,而传统的方法对标本中结核杆菌活力要求较高,经过抗结核治疗后的患者,其标本中的结核杆菌因为抗结核药物的影响往往不容易培养出来,从而影响医师的判断。
结核杆菌耐药基因检测技术是当前临床诊断耐多药结核病最先进、快速的方法之一,全部试验过程仅仅需要2天就可以报告结果。比起传统的检验方法,报告结果时间明显缩短,减少了医师和患者等待的时间。
目前该技术已经在安阳市结核病防治所成功投入应用。该技术的应用,极大提升了我市耐多药结核病的检验检测水平,为我市结核病疫情控制发挥了积极作用,同时为我市结核病患者的诊断、治疗带来了福音。
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